Тимберлейк родился в Мемфисе, штат Теннесси у родителей Рэндалла Тимберлейка и Линн Bomar. Его дед по отцовской линии, Charles L. Timberlake, был баптистский священник, но Тимберлейк больше считает себя «духовным человеком, чем религиозным". Его родители развелись и теперь у обоих другие семьи, его мать, которая сейчас руководит развлекательной компанией под названием JustinTime Entertainment, повторно замужем за Полом Харлессом, банкиром, в то время как его отец, регент при баптистской церкви, имеет двоих детей, Джонатан и Стивен, от второго брака.

Тимберлейк вырос в Millington, небольшом городке к северу от Мемфиса. В 1993 году он получил свой первый вкус славы, когда он вступил в ряды Клуба Микки Мауса. Там он познакомился с будущей подругой и поп-звездой Бритни Спирс, будущей известной певицей Кристиной Агилерой и, пожалуй, самое главное, будущим коллегой по группе JC Chasez. Когда шоу закончилось в 1995 году, Timberlake сформировал с другом Крис Киркпатрик свою группу по названием 'N Sync.

Самое большое вдохновение Тимберлейку принёс король поп-музыки Майкл Джексон, его влияние заметно в постановке танцев и стиль в пении.

1995-2002: 'N Sync

Тимберлейк был членом популярного бойз-бэнда 1990-х годов, 'N Sync, и считался кумиром подростков. Группа образована в 1995 году и начала свою карьеру в 1996 году в Германии, однако в США стала известной два года спустя в 1998 году, результатом этой группы стал альбом No Strings Attached , который стал самым быстро продаваемым альбомом всех времен в 2000 году. В 2002 году, после завершения своего тура знаменитости и выпуска «Girlfriend", третьего сингла с их альбома 2001 году, группа решила сделать перерыв, после чего Тимберлейк начал работу над своим первым сольным альбомом. Примерно в это же время, в марте 2002 года, Timberlake расстаётся со своей подругой Бритни Спирс. Это повлияло на творчество Тимберлейка, выходит новый хит-сингл «Cry Me A River".